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　　GADAb試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）往預先包被人谷氨酸脫羧酶自身抗體（GAD-Ab）獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人谷氨酸脫羧酶自身抗體（GAD-Ab）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　GADAb試劑盒樣品收集，處理及保存方法：

　　1.血清：使用不含熱源和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，采集血液后3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心的分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉離心30分鐘取上清。

　　3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本采集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻的充分解凍。

　　GADAb試劑盒操作注意事項：

　　1.試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱時結晶*溶解后再使用。

　　2.實驗中不用他的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　3.標準品稀釋液即可視為應性對照或者空白，預處理后的樣本無需稀釋，直接取10u1加樣即可。

　　4.嚴格按照說明書中表明的時間，加樣量及順序進行溫育操作。

　　5.所有液體組分使用前充分搖勻。